Knudsonin kasvatusalusta orkideoille

Knudsonin kasvatusalusta on keinotekoinen ravinnealusta, jonka amerikkalainen kasvitieteilijä Lewis Knudson kehitti vuonna 1946 orkideoiden siementen idättämiseen ja kasvun edistämiseen steriileissä olosuhteissa. Se on yksi yleisimmin käytetyistä kasvatusalustoista orkideoiden viljelyyn in vitro ja on suosittu sekä laboratorio- että kotikäytössä.

Mikä on Knudsonin medium?

Orkideat kasvavat luonnostaan symbioosissa mykorritsasienten kanssa, jotka tarjoavat niille välttämättömiä ravinteita. Tämän symbioosin lisääminen laboratorio-olosuhteissa on kuitenkin mahdotonta. Knudson-elatusaine kehitettiin ravinnepitoiseksi korvikkeeksi, joka tarjoaa kaikki siementen itämisen ja taimien kasvun kannalta tarvittavat välttämättömät elementit.

Knudson-alustan koostumus

Vakiokaava sisältää:

• Sokeri: ensisijainen energianlähde.
• Mineraalisuolat:
  • Kaliumnitraatti (kno₃) – typen lähde.
  • Magnesiumsulfaatti (mgso₄) – sisältää magnesiumia ja rikkiä.
  • Kaliumdivetyfosfaatti (kh₂po₄) – sisältää fosforia ja kaliumia.
  • Kalsiumkloridi (cacl₂) – kalsiumin lähde.
• Vitamiinit:
  • Nikotiinihappo, tiamiini ja pyridoksiini aktivoivat aineenvaihduntaprosesseja.
  • Rauta, sinkki, mangaani ja muut kudosten kehitykselle välttämättömät alkuaineet.
  • Agar-agar kiinteän kasvualustan luomiseksi, joka estää siemeniä tai taimia uppoamasta.
• Hivenaineet:
• Hyytelöimisaineet:

Knudson-väliaineen käytön edut

1. Stimuloi siementen itämistä:
   • Tarjoaa kaikki tarvittavat ravinteet itämistä varten, korvaaen sienisymbioosin tarpeen.
2. Steriili ympäristö:
   • Luo ihanteelliset kasvuolosuhteet ilman bakteeri- tai sienikontaminaatioriskiä.
3. Optimaaliset kasvuolosuhteet:
   • Tukee taimien kehitystä, kunnes ne ovat valmiita istutettavaksi kasvualustaan.
4. Sopii eri orkidealajeille:
   • Koostumusta voidaan säätää vastaamaan eri orkidealajien erityistarpeita.

Knudson-väliaineen sovellukset

1. Siementen itävyys:
   • Orkideoiden siemenet steriloidaan (yleensä natriumhypokloriittiliuoksella).
   • Steriilit siemenet asetetaan ravintoalustan pinnalle petrimaljoihin tai koeputkiin.
2. Taimen kasvu:
   • Kasvualusta tukee taimien kehitystä, kunnes lehdet ja alustavat juuristot ilmestyvät.
3. Siirto kasvualustaan:
   • Kun taimet ovat saavuttaneet sopivan koon, ne siirretään sopivaan kasvualustaan (esim. kaarnaan, rahkasammaleeseen).

Miten Knudson-alusta valmistetaan?

Ainekset (esimerkki 1 litraan):

• Agar-agar: 10 g
• Sokeri: 20 g
• Kh₂po₄: 250 mg
• Mgso₄·7h₂o: 250 mg
• Cacl₂·2h₂o: 250 mg
• Kno₃: 500 mg
• Vitamiinit (tiamiini, nikotiinihappo): 1 mg kutakin
• Mikroelementit (esim. feso₄): 1–2 mg
• Tislattua vettä: 1 l

Vaiheet:

1. Liuota kaikki komponentit tislattuun veteen.
2. Lisää agar-agar ja kuumenna, kunnes se on täysin liuennut.
3. Kaada liuos steriileihin astioihin (petrimaljoihin, koeputkiin).
4. Steriloi kasvatusalusta autoklaavissa tai vesihauteessa (15 minuuttia 121 °C:ssa).
5. Jäähdytä väliainetta, jotta se jähmettyy.

Vinkkejä knudson-väliaineen käyttöön

1. Steriiliyden ylläpitäminen:
   • Työskentele steriileissä olosuhteissa kontaminaation välttämiseksi.
2. Lämpötilan seuranta:
   • Säilytä viljelmät +20–25 °C:ssa.
3. Tarjoa riittävästi valoa:
   • Varmista pehmeä, hajautettu valaistus 12–14 tuntia päivässä.
4. Istutus:
   • Siirrä taimet kasvualustalle, kun ne ovat riittävän suuria itsenäiseen kasvuun.

Johtopäätös

Knudson-kasvualusta on kriittinen työkalu orkideoiden siementen onnistuneeseen idättämiseen ja terveiden taimien kasvattamiseen. Se tarjoaa täydellisen tasapainon ravinteille kasvulle, mikä poistaa sienisymbioosin tarpeen. Tämä kasvualusta sopii erinomaisesti harvinaisten ja koristeellisten orkidealajien lisäämiseen joko laboratoriossa tai kotona.